妙手仁心,鉴“毒”利器
“2019新型冠状病毒”,简称“2019-nCoV”,是一种非SARS而类SARS的肺炎病毒。该病毒于2019年12月31日在武汉引起多人患病而受重视,其后迅速蔓延,在武汉境内肆虐,渐有野火燎原之势。全国人民皆为之色变,其扩张之迅猛让人们重新回想起2003年被SARS支配的恐惧……
这样的统计数字也许还会增加,只有迅速识别2019-nCoV并严密监控才有可能减少人群传播。
数字PCR是一种核酸单分子绝对定量技术。它将微升级的反应体系划分为数万个纳升级反应室,单独扩增计数,再汇总分析。这种“化整为零”的设计,极大地提升了PCR定量技术的灵敏度,带来了以下优势:
(1)实现对微量病原体核酸的精确定量;
(2)能够从大量背景信号中检测到病原体核酸;
(3)摆脱了对标准曲线的依赖,无需公式换算,实现病原体拷贝的绝对定量。
锐讯DropX-2000数字PCR系统
数字PCR技术犹如一把鉴“毒”利器,让2019-nCoV无处遁形!
Assay/ Use | Oligonucleotide ID | Sequence (5’–3’) | Comment |
RdRP gene | RdRP_SARSr-F2 | GTGARATGGTCATGTGTGGCGG | use 600 nM per reaction |
RdRP_SARSr-R1 | CARATGTTAAASACACTATTAGCATA | use 800 nM per reaction | |
RdRP_SARSr-P2 | FAM-CAGGTGGAACCTCATCAGGAGATGC-BHQ-1 | Specific for 2019-nCoV, will not detect SARS-CoV use 100 nM per reaction and mix with P1 | |
RdRP_SARSr-P1 | ROX-CCAGGTGGWACRTCATCMGGTGATGC-BHQ-1 | Pan Sarbeco-Probe, will detect 2019-nCoV, SARS-CoV and bat-SARS-related CoVs use 100 nM per reaction and mix with P2 | |
E gene | E_Sarbeco-F1 | ACAGGTACGTTAATAGTTAATAGCGT | use 400 nM per reaction |
E_Sarbeco-R2 | ATATTGCAGCAGTACGCACACA | use 400 nM per reaction | |
E_Sarbeco-P1 | HEX-ACACTAGCCATCCTTACTGCGCTTCG-BHQ-1 | use 200 nM per reaction |
W is A/T; R is G/A; M is A/C; FAM, 6-carboxyfluorescein; ROX, Carboxy-x-Rhoadamine; HEX, Hexachlorofluorescein; BHQ-1, black hole quencher-1。
摘自《Diagnostic detection of 2019-nCoV by real-time RT-PCR》(锐讯生物使用BHQ-1代替BBQ)。
温度 | 时间 | 循环数 |
53℃ | 15min | 1 |
97℃ | 10min | 1 |
95.3℃ | 30s | 40 |
55℃ | 60s | |
98℃ | 10min | 1 |
20℃ | 1min | 1 |
锐讯数字PCR法新型冠状病毒核酸检测试剂盒,采用RNA一步法逆转录定量检测的方法,可在一次反应里同时检测2019-nCoV的两个标志性基因并可与高度同源的SARS及bat-associated SARS相关病毒进行区分,实现对病毒载量的精确、绝对定量。
该试剂盒搭配锐讯生物开发平台DropX-2000使用,在高度自动化操作的同时,一个样品孔中完成2019-nCoV(FAM)、E gene(HEX)、SARS-related CoV(ROX)的检测,节约医务人员的操作时间,提升检测效率。该数字PCR平台的样本均独立在芯片中,不与外界接触,在节省检测时间、减少人为误差的同时,让医务工作者更安全。
危急关头,锐讯生物秉承仁心仁德,手持鉴“毒”利器,与医患同心,携手共度难关!
电话:0512-67503398
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