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生物医学是实验科学,需要通过实验来进行分子表达检测、表型检测和机制验证,以实验证明理论正确性。
然而,想做好基础实验并不是一件容易的事,需要研究人员花费大量时间和精力在实验室,重复实验操作,才能输出实验成果。
解螺旋为大家整理出14个基础实验详尽教程里面不仅包含了实操步骤,带大家PCR、WB等基础实验原理到基因过表达、RNAi等基因表达实操,从实验试剂推荐到疑难杂症的解析,最后结合文献信息,学习相关实验技能!(划到底部立即领~)
今天给大家带来最全表达检测资料!
超全超好用
目录
部分截图:
1
7个基因表达检测实验
包含7个基因表达检测详尽教程,如rtPCR、PCR引物设计、RNA抽提、RT-qPCR、WB实验、IHC实验、免疫组化图像分析
每个实验都详细介绍了样品制备、操作要点、数据分析……
1
rtPCR
rtPCR 技术可以分解为:RNA 抽提、反转录、PCR、PCR 产物检测。
2
PCR 引物设计
PCR,相信我们都不陌生,是一种选择性体外扩增DNA或RNA片段的方法,即通过试管中进行的DNA复制反应,使极少量的基因组DNA 或RNA样品中特定基因片段在短短几小时内扩增上百万倍。

3
RNA抽提
RNA抽提有很多种方法,其中TRIzol法是最流行的。
4
RT-qPCR
以cDNA为模板进行PCR,在PCR扩增过程中,通过收集荧光信号,对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期,模板的Ct 值和该模板的起始拷贝数存在线性关系,所以可以定量。
5
WB实验
蛋白免疫印迹(Western Blotting)是将电泳分离后的蛋白质从凝胶转移到NC膜或PVDF膜上,然后用特异 性抗体检测某特定蛋白的一种蛋白质检测技术。
6
IHC实验
免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)利用抗原与抗体特异性结合的原理,使用抗体去标记组 织细胞内的蛋白质,然后通过化学反应使抗体显色来确定组织细胞内的蛋白质的位置和表达量。
7
免疫组化图像分析
使用软件Image-Pro Plus 6(IPP6)分析单张免疫组化图像、多张免疫组化图像以及批量分析免疫组化图像,包括校正图片、选定测量项目、选定测量范围、测量、输出数据等详细步骤。
......
2
7个基因表达操作实验
1
过表达
基因过表达操作流程为构建基因过表达载体——转染——检测过表达效果。
2
融合基因表达
构建融合基因克隆的重点在引物设计,而引物设计要点在——不能移码!不能中间就终止!
3
长片段/突变基因表达
长片段/突变基因克隆的重点在引物设计和 PCR。
4
RNAi
RNAi 技术的重点在 siRNA 设计,siRNA 设计优先使用文献中或预设计siRNA库中已经验证过的siRNA靶点,实验时同时使用多个有效靶点以排除脱靶效应,既可以直接使用siRNA片段,也可以使用shRNA来进行RNA干扰。
5
miRNA 靶序列寻找
microRNA(miRNA)是一类长度在 22nt 左右的小 RNA 分子,它并不编码 蛋白质,因此 miRNA 与 siRNA 和 circRNA 等小 RNA 分子一样,也是一种非编 码 RNA。
6
miRNA QPCR 检测
在做qPCR的过程中,常常会出现各种问题,让初学者一筹莫展,要debug,首先要明白bug是怎么出现的,才能对症下药。
7
流式检测细胞周期
PI法是经典的周期检测方法,PI为插入性核酸荧光染料,能选择性地嵌入 DNA双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系,用流式细胞仪进行分析,就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态,从而计算出各个期的百分含量。
......

3
读文献学实验
身边很多小伙伴刚开始读实验类文献的时候都是这样的:
1.读标题:这什么鬼,看不懂
2.读概述:emmm我好像大概应该明白了
3.拉到下面,扫了一眼:WOC怎么这么多图!这都是什么鬼?这个&*(…%是什么?这个#¥%@^又是什么?
4.还是其他文章更适合我
不知道屏幕前的你,是不是也是这样呢?
解螺旋精选了几篇文献,教大家如何通过阅读Results标题获取“故事大纲” ,快速了解文献中所用的实验方法帮助大家完善和调整实验设计,通过实验过程进一步理解和领悟文献中的相关细节。
......
以上
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内容较多,整理不易
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