细胞培养做为生物学研究最基础的技术之一,可以说是渗透科研界的方方面面。工欲善其事,必先利其器。细胞好不好,就看你懂不懂细胞培养的各种技术了。今天小编就将自己压箱底的细胞培养经验拿出来供大家分享:
❤  原代培养
从原代组织中分离细胞的最常用的方法是酶解法(胰蛋白酶和胶原酶)。
用无菌的解剖刀和剪子将组织剪成3~4mm小片,用平衡液(无钙镁离子)清洗组织碎片后去除上清液,并加入0.25%的胰蛋白酶(Trypsin,100mg组织加入1ml胰蛋白酶)或者胶原酶(Collagenase,50~200单位/ml),孵育4-18h。离心取上清后,用平衡液清洗几次后,用完全培养基悬浮细胞,进行培养。
❤  传代培养
依据细胞生长的特点,传代方法有3种:
1. 悬浮生长细胞传代(离心法)
将悬浮细胞离心(1000 rpm, 3 min)去上清,收集沉淀物加新培养基,混匀后进行传代培养。
2. 半悬浮生长细胞传代(直接吹打法)
此类细胞(如Hela细胞)部分贴壁,但黏贴不牢,可用直接吹打法使细胞从瓶壁上脱落下来,进行传代。
3. 贴壁生长细胞传代(酶消化法)
去除瓶内培养液后,加入1-2ml 0.25%的胰蛋白酶液(以消化液覆盖整个瓶底为准)37℃静置2-10min(显微镜下动态监测)。移去蛋白酶液,加入培养液反复吹打瓶壁细胞,离心将细胞沉淀用培养液制成细胞悬液。吸取1/10—1/40细胞悬液,接种于含有适量新鲜培养液的新培养瓶中进行传代培养。
    ......
细胞培养是一个不断进步的过程,在平时做好积累,量变才会有质变。《细胞培养(第3版)》全方位介绍了细胞培养的方方面面,实为一本不错实验秘籍。
除了细胞培养基本知识,细胞培养室的设置、设备和准备工作,细胞培养用液及培养基外,本书还补充了一些细胞培养的新技术,如三维细胞培养技术各类肿瘤试验模型诱导多能干细胞培养细胞克隆形成杂交瘤细胞制备等。
为了帮助广大临床医生及科研工作者小编决定再次开放0元包邮免费领书活动~
活动真实、有效、免费,请大家放心参加哦~
免费领取方式
扫描对应海报二维码
参与活动就能0元包邮免费领取
每种书限量300本
1
细胞培养(第三版)
▲ 
扫码0元领取
 推荐理由:
本书作为研究生教学用书,简要介绍细胞培养的基础理论,较详细地叙述哺乳类动物细胞培养必需的用品器材、具体的操作步骤及操作提示等
主要内容包括:细胞培养基本知识;细胞培养室的设置、设备和准备工作;细胞培养用液及培养基;二维及三维细胞培养技术(细胞原代培养、传代培养、细胞冻存与复苏、细胞系鉴定方法、三维细胞培等);
上皮细胞、干细胞等各类正常组织细胞的培养;肿瘤细胞培养、肿瘤药物敏感性试验、肿瘤放射敏感性试验、裸鼠移植瘤模型等各类肿瘤试验模型;细胞活力的检测、细胞凋亡检测、细胞遗传学及细胞形态学等细胞培养中的研究方法;
细胞和细胞器的分离、细胞克隆形成及杂交瘤细胞制备等有关的实验技术;培养细胞的原位杂交、细胞的基因转移等有关的分子生物学实验技术;
细胞检测相关的仪器分析技术(流式细胞仪、激光扫描共聚焦显微镜、扫描电子电镜、透射电子电镜、原子力显微镜及活细胞工作站)。本书可供生物学、医学等相关专业人员在科学实验中参考。
2
医学信号通路图解
▲ 
扫码0元领取
 推荐理由:
一篇的文章的精华都在于图片的展示,一张美观的通路机制图可以帮助我们形象直观地理解复杂的通路机制网络,《医学信号通路图解》中的图片来自高分杂志中的精华部分,对各个常见病种、常见机制的深入分析及总结归纳,将通路机制涉及相关的知识点进行拓展和归纳总结,有助于大家对疾病及机制有全面的认识。
     文中对图片进行解读,内容涉及干细胞的起源及克隆进化、肿瘤浸润淋巴细胞、肿瘤代谢通路、免疫代谢、铁死亡、蛋白互作网络等科研热点问题。能帮助大家直观了解相关热点问题的研究方法和思路,帮助读者理解与记忆,从而较好运用到自己的科研实践之中。
3
医学实验基本技术
▲ 
扫码0元领取
 推荐理由:
浙江大学医学院附属邵逸夫医院整形外科谈伟强主任医师写给医生和医学生的一本实验技术入门书籍。本书涵盖了医学科学研究从课题设计到实验技术、结果分析及论文写作的各个部分。 
本书绝大部分内容为谈伟强医师在美国做访问学者期间的实验笔记。美国洛杉矶Cedars-Sinai医学中心生物医学部每年可发表大量高影响因子的文章,其实验室负责人Kenneth Berntein教授仅发表于Nature及其子刊的文章就有7篇。
而令人惊讶的是,实验室所用的绝大部分实验技术是一些常用、基本的技术,其中采用多的为流式细胞仪技术,其他还有Western blot、PCR、ELISA等,所用的实验动物全部为小鼠和大鼠。
学会这些技术,大部分医学实验能顺利完成;部分日常很少用到的技术未收入本书中,实验者在需要应用前再针对性地学习即可。

不要犹豫!立即扫码参与“0元包邮免费领书”活动。
点击「在看」,也可以将文章分享给自己朋友,让更多人领取!
继续阅读
阅读原文