【写在前面】上期推文简单解读了下一篇IF13+的中药单体药理是如何设计撰写出来的之题目、摘要、前言以及部分结果（点击查看）。大家可以比较下，自己的文章与高分文章之间的差距在哪里，或许你也能发高分。本次推文将继续推送的这篇文章：（点击标题阅读往期推文）
【单体药理-IF13.5】南中医等团队揭示一种石斛提取物抑制肺癌-通过钙/钙调素依赖性铁死亡机制
下面继续上一期推文：
1.结果部分
1.1 Erianin触发细胞死亡，抑制细胞增殖并促进肺癌细胞中G2/M的细胞周期停滞
    这里呢，证明毛兰素对肺癌细胞的作用，主要考察了细胞死亡，抑制细胞增殖并促进肺癌细胞中G2/M的细胞周期这三部分。结果展示见Figure1。图看上去比较美观直白。
Figure1:
a.使用CCK-8测定法测量细胞活力。b.代表性的细胞形态变化。c，d. 膜联蛋白V/FITC/PI染色的代表性结果和定量分析。e.单层细胞孵育； 菌落数量的定量分析（f，g）。h.细胞周期和定量分析的代表性结果（i，j）
非常直观明了。由于该期刊规定的版本格式是先结果后方法，所以这里先介绍结果部分。
方法部分在文章最后：
      可以看下方法，自己文章也可以这么写，那该文章描述均相对简单。
      看完了第一部分的结果是不是感觉就是大家平时做的体外实验呢！我看了下中文期刊，这部分相当于一篇科技核心或者中文核心的内容。
1.2 Erianin抑制肺癌细胞的迁移
      接下来是考察Erianin对肺癌细胞迁移的抑制作用。
Erianin抑制肺癌细胞的迁移。a.划痕试验的代表性结果。b.使用24孔Transwell系统进行Transwell迁移测定并进行定量分析（原始放大倍数：×100）。c.每个Transwell板在五个有代表性的高倍视野中计数迁移的细胞数。d. erianin处理24 h后，通过蛋白质印迹法检测了几种关键细胞转移信号调节剂，vimentin, E-cadherin, N-cadherin, slug, snail, and MMP-9的表达。
      从抑制迁移的作用到影响迁移的蛋白信号，完整考察了该单体抑制作用。
      然后联系本文主题，铁死亡。谈到：
于是进一步考察
1.3 Ferroptosis促成Erianin诱导的肺癌细胞死亡。
      首先，使用Z-VAD-FMK（泛半胱氨酸蛋白酶抑制剂），氯喹（CQ，自噬的有效抑制剂）或necrostatin-1（坏死性强效抑制剂）进行治疗，无法防止这些细胞中Erianin诱导的细胞死亡。
接下来，通过转录组分析确定了在经erianin处理和未经处理的肺癌细胞中差异表达的基因。并采用热图及KEGG分析得到铁死亡可能是影响肺癌细胞死亡的因素。
      然后进一步去实验验证铁死亡可抑制Erianin诱导的肺癌细胞死亡。文中说到众所周知，脂质反应性氧（ROS）积累，脂质过氧化和谷胱甘肽（GSH）耗竭是铁死亡的关键事件。并进一步考察了铁死亡的调控靶点在erianin诱导下肺癌细胞中表达情况，以及铁死亡抑制剂作用下，细胞死亡影响如何。结果如下：
a.通过流式细胞仪分析细胞ROS水平。b.erianin处理的H460和H1299细胞的细胞内GSH水平。c.用erianin处理的H460和H1299细胞中的细胞内MDA水平。d.将H460和H1299细胞在有或没有ROS清除剂NAC的情况下，用erianin处理24小时，并测定细胞活力。在有或没有ROS清除剂GSH的情况下，用erianin处理H460和H1299细胞24小时，并测定细胞活力。f.使用荧光指示剂Phen Green SK（绿色）测定了用依安宁处理的H460和H1299细胞中的细胞内可螯合铁。g.使用透射电子显微镜（TEM）观察肥大症在H460和H1299细胞中（原始放大倍数：×100）。h.通过Western印迹检查了几种主要的促肥大作用调节剂的表达。i.在有或没有铁素体病抑制剂的情况下，将H460和H1299细胞用erianin处理24 h，并检测其生长抑制作用。
这里可以看下方法部分是如何表达的：
仅仅比较简单的讲了下。但实际结果中可能的工作量巨大。
1.4 钙/钙调蛋白信号传导促进erianin诱导肺癌细胞的铁死亡。
      作者为更深入探讨毛兰素可能的靶点和作用机制，使用在线工具SwissTarget Prediction进行目标预测，得到CaM/CALM这个信号通路。于是初步试验发现并推测，erianin可以激活CAM，随后引起Ca2+和Fe2+水平升高，从而导致铁死亡的发生。
那如何判断和设计试验确定Ca2+/CaM signaling就是erianin诱导的铁死亡中间调控靶点呢？于是作者采用calmidazolium抑制这个信号，并选择了关键的蛋白靶点证明calmidazolium甲硝唑对CaM的抑制作用挽救了毛兰素诱导的细胞铁死亡。
1.5 Erianin导致ferroptosis的诱导并发挥抗肿瘤作用体内功效
前文已经证明了毛兰素可诱导的细胞铁死亡，以及该抑制铁死亡可能由Ca2+/CaM signaling减轻。同时也探究了上述调控作用可能的机制（均为体外）。于是顺理成章就需要体内进行验证。
      一般开展体内机制研究，均会先考察体内作用效果。本文也是：
体内药效实验结果包括：a. erianin治疗后H460异种移植肿瘤的代表性图像。b.每组的肿瘤体积。c.肿瘤接种和全身注射方案。d.治疗后不同时间点播散的H460-luc原位异种移植肿瘤的生物发光成像，以及在毛兰素治疗后H460-luc原位异种移植肺肿瘤的代表性图像。e.通过生物发光成像确定，标准化至第0天肿瘤负荷后，每只小鼠的平均辐射率变化倍数。f.每个治疗组在实验终点（第12天）时每只小鼠的平均辐射率变化倍数。
就采用一张图全部搞定了！
再看下该结果对应的方法是如何写的：
 接着，还考察了erianin在体内对其他器官作用，体内作用机制本文验证相对较少，可能体外细胞中已经完整考察了。仅考察了几种促铁蛋白和转移蛋白的免疫组织化学染色，可简单说明体内毛兰素也可诱导铁死亡就结束研究了。
体内实验总结（原文）：Taken together, our results suggest that erianin inhibited tumor growth in vivo by inducing ferroptosis and suppressed cancer metastasis by inhibiting epithelial–mesenchymal transition.
2.讨论部分
给出图文摘要，讨论部分也相对简洁。
首先介绍了毛兰素来源，以及整篇文章研究结果。然后分段介绍了细胞凋亡、细胞死亡。文中经常出现承上启下的语句：Therefore, developing new agents that enhance different forms of non-apoptotic cell death will hopefully provide a promising therapeutic strategy for cancer patients。
      接下来采用两段分别对毛兰素的药效和机制进行阐释。（下面是原文）
      这里看到，全文可将铁死亡即做了药效指标，又做了作用机制。毛兰素可诱导铁死亡，但细胞死亡又可由铁死亡促进（机制）。然后作为药效的铁死亡，又用一个在线的工具预测了可能的信号通路，进行探究。
3.结论部分
      本文正文没有单独的结论部分。讨论部分最后一段进行了总结：In summary, our research demonstrated that erianin might be a new ferroptosis inducer and has the potential to induce cell death and inhibit metastasis in lung cancer cells. Our data will hopefully support the use of erianin as a potential compound for lung cancer treatment. To maximize the potential of erianin for application in the clinic, large-scale, multicenter collaborative clinical trials will be urgently needed in the future.
总而言之，我们的研究表明，erianin可能是一种新型的促细胞铁死亡诱导剂，并具有诱导细胞死亡和抑制肺癌细胞转移的潜力。我们的数据有望支持将erianin用作潜在的肺癌治疗化合物。为了最大程度地利用erianin在临床中的潜力，将来迫切需要进行大规模，多中心的合作临床试验。
      怎么样看完整篇文章的解读，是否对发高分有信心了呢！如果对这篇文章感兴趣点击原文链接下载阅读，看看是如何表达的！
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关键词
蛋白
细胞中
铁死亡
抑制剂
机制